如何明智的选择一台对自己最合适的显微镜——光学部件物镜的选择(下)

来源:华体会登录    发布时间:2024-01-16 08:44:23

  ● 物镜能够准确的通过其放大倍率分为三大类。这中间还包括:低倍物镜(2x、4x/5x和10x),中倍物镜(20x、40x)和高倍物镜(60x/63x、100x)。除了物镜的放大倍率不同外,物镜使用的介质也不同。例如,对于高倍镜头(60x和100x),常常使用浸油来获得高分辨率。放大倍率较低的镜头则采用空气作为介质。

  2、选择哪种观察方式?● 显微物镜有很多类型,应用场景也各有不同,根据观察方式的不同,也有不一样的种类。一般在物镜的外壳上会标注物镜的观察方式。

  ● BF:明场;DF:暗场;PH:相差;PO:偏光;DIC:微分干涉;FL:荧光观察(蓝、绿、紫等);UVFL:紫外荧光观察。

  ● ①要选择有平场矫正功能的物镜,即标有Plan。 ②主要是依据色差校正的能力来判断成像效果:消色差物镜(Achromatic):仅能校正红蓝光的色差。半复消色差物镜(FL):能校正红绿蓝三色光的色差。全复消色差物镜(Apo):能对红绿蓝三色光的色差校正两次,同时能校正红、蓝两色光的球差。

  ● 看透明切片可选择平场消色差物镜(Ach)。看荧光可选择半复消色差物镜(FL),而且有长工作距离可选,既可以看玻片也可以看培养皿。若需要更好的成像效果可选择全复消色差物镜(Apo),但Apo物镜没有长工作距离的,只适用于看玻片,不适合看培养皿或培养瓶等厚的样品。

  ● 在标注物镜的光学类型的后面(∞/0)(210/0),也就是斜杠后面这一个数字代表的是适用玻片厚度,(∞/0.17)(210/0.17),适用玻片厚度就是0.17毫米。如果用了不合适的盖玻片,则会出现很明显的球差(不同角度的光线没有会聚在同一高度)以此来降低成像的对比度和分辨率。NA值越高的物镜对盖玻片厚度越敏感,所以要挑选出正规的盖玻片。有些高NA值的物镜以及长工作距离的物镜有可调的盖玻片厚度调节环可以对不同厚度的玻璃进行矫正,可用于培养皿的观察,观察时调节到相应的培养皿的厚度,或使用共聚焦培养皿,中间厚度也为0.17。

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